掌握微生物膜正確使用方法是確保數據可靠的核心

更新時間：2025-10-22

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　　微生物膜是一種高度敏感的生物傳感材料或過濾介質，廣泛應用于微生物檢測、膜生物反應器（MBR）、細胞培養及生物傳感器中。它不僅能夠截留微生物，還能為微生物群落提供附著生長的微環境，實現對生物活性的精準調控。掌握微生物膜的正確使用方法，是確保實驗成功、數據可靠與系統穩定的核心。

　　第一步：使用前準備與環境確認

　　在潔凈、無菌的環境下操作，避免外源微生物污染。檢查微生物膜包裝是否完好，確認在有效期內。根據用途選擇合適類型：

　　檢測用膜：如0.45μm或0.22μm孔徑的醋酸纖維素（CA）或聚醚砜（PES）濾膜，用于水樣中細菌的富集。

　　生物載體膜：如聚氨酯泡沫、陶瓷膜或改性纖維膜，用于生物膜反應器中微生物的固定化。

　　確保操作臺、鑷子、培養皿等器具已滅菌（高壓蒸汽或紫外線照射）。

　　第二步：膜的取出與裝載

　　佩戴無菌手套，用無菌鑷子從包裝中取出膜片，嚴禁手指直接接觸膜面。對于過濾應用，將膜小心放置于無菌過濾漏斗或濾器支撐網上，確保膜與密封圈貼合，無褶皺或氣泡。對于生物反應器，按設計要求將載體膜裝入反應槽或模塊中。

　　第三步：樣品處理與過濾（適用于檢測膜）

　　將待測水樣或溶液通過真空或加壓方式抽濾。控制流速適中，避免過高壓力導致膜破裂或微生物損傷。過濾完成后，用少量無菌緩沖液沖洗濾器內壁，確保微生物全部截留在膜表面。

　　第四步：轉移與培養

　　過濾后，用無菌鑷子將膜輕輕轉移到預置的固體培養基（如營養瓊脂、m-Endoagar）上，膜與培養基接觸。對于倒置培養法，確保膜面朝上，防止滑動。蓋好培養皿，標記樣品信息。

　　第五步：培養條件控制

　　將培養皿放入恒溫培養箱，按目標微生物要求設定溫度與時間：

　　總大腸菌群：37±1℃，24小時。

　　糞大腸菌群：44.5±0.2℃，24小時。

　　保持濕度，防止培養基干裂。避免陽光直射，防止非目標菌生長。

　　第六步：結果觀察與計數

　　培養結束后，觀察膜表面菌落形態、顏色與數量。典型菌落（如金屬光澤、紅色中心）可初步判定。使用菌落計數器進行精確計數，結果以CFU/100mL表示。

　　第七步：生物膜反應器中的活化與運行（適用于載體膜）

　　新裝載體膜需進行“掛膜”啟動：注入富含營養的污水與接種污泥，在低負荷下連續曝氣7-14天，使微生物在膜表面形成穩定生物膜。運行期間控制溶解氧、pH、溫度與水力停留時間，維持生物活性。

　　第八步：使用后處理

　　一次性檢測膜使用后應高壓滅菌（121℃,30分鐘）后按醫療廢物處理。可重復使用的載體膜需清洗（反沖洗或化學清洗），去除老化生物膜與污垢，恢復通量。